凝胶迁移或电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA/RNA结合蛋白和其相关的DNA/RNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。依据实验需要,设计标记探针、非标记探针、蛋白特异性抗体等参照物,基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理,当转录因子与特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。
安必奇生物提供的EMSA实验,基于生物素标记探针与对应的DNA结合蛋白的特异性结合,设计合理、科学的实验方案,为客户提供验证性的EMSA,竞争性的EMSA以及超迁移EMSA(Super-shift EMSA)实验服务。
EMSA凝胶阻滞迁移电泳检测原理图
服务内容
服务内容 | 项目说明 |
验证性EMSA | 验证生物素标记探针与结合蛋白互作的EMSA |
竞争性EMSA | 生物素标记探针、非标记探针与结合蛋白互作的EMSA |
超迁移EMSA | 特异性抗体进一步鉴定探针与蛋白结合物的EMSA |
技术流程
技术流程 | 说明 | 周期 |
探针设计合成 | 客户提供结合基因序列或参考文献来分析设计合成 | 1-2周 |
标准蛋白样品制备与定量 | 蛋白标准样品的制备与浓度测定,蛋白样品制备要现配现用 | 1周 |
EMSA 凝胶电泳迁移检测 | 泳道设定及浓度梯度实验设计 | 1周 |
结合蛋白的纯化与质谱检测(未知蛋白需要检测) | 蛋白纯化,质谱检测进行肽段检索与聚类分析 | 1-2周 |